北欧食品分析委员会(NMKL)
NMKL122-1987
饮料－糖精的测定－液相色谱法
1 范围
本法为软饮料、果汁中糖精的定量测定法，适用于每kg食品中至少含25mg糖精钠的检测。
2 原理
软饮料、果汁中所含糖精能被乙醇萃取出来，带紫外检测器的反相液相色谱仪能在254nm 处测定乙醇萃取液中的糖精含量。
3 试剂
所有的试剂均为分析纯，水为液相色谱纯的水。
3.1 醋酸溶液(1%) 用水将10mL 醋酸(100%)稀释至1000mL，过滤；
3.2 甲醇；
3.3 乙醇：95%；
3.4 流动相：950mL 醋酸溶液(1%)和50mL甲醇混合；脱气处理；
3.6 糖精钠标准溶液(100mg/mL)：溶解25.0mg 糖精钠于水中并用水稀释至250mL 。
4 仪器设备
4.1 液相色谱仪：带洗脱设备（单溶剂洗脱设备及可变换流动相（多阶式梯度）或梯度系统）；注样器；泵；紫外检测器（可检测波长为254、280、207或214nm）；色谱柱（反相柱，填充料粒子尺寸为10μm）；保护柱（填充料粒子尺寸为37~50μm，C18柱）；记录仪；
4.2 磁性搅拌器；
4.3 膜滤器：适用于水溶液，孔的大小为0.45μm；
4.4 注射器：10、100、5000μL；
4.5 超声波水浴，带水抽气泵；
4.6 离心机；
4.7 各种量筒、移液管和锥形烧瓶；
4.8 水浴锅和减压蒸发器。
5 试样制备
软饮料和果汁：在超声波水浴中除去二氧化碳，如果有粒子存在则过滤后，再进行高效液相色谱检测；
6 操作步骤
6.1 液相色谱操作条件：
流量：2mL/min；
温度：室温；
灵敏度：0.02—0.005ausf*（满刻度量程的吸收值单位）；
记录仪：10mV；
记录纸速：10mm/min。
6.2 测定
单溶剂色谱测定（适用于软饮料和果汁中糖精含量检测） 采用流动相作洗脱剂。注射10μL 标准溶液或样品溶液，重复操作直至结果差异在2%以内。由于糖精的保留时间较短，因此可将其从样品的其它组分（如防腐剂）中分离出来。测量标准溶液和样品的峰高。
（下略）
