中国人民共和国国家标准
GB/T 5009.150
果品制品－红曲色素的测定－薄层层析法
1 范围
本标准规定了用薄层层析方法测定食品中红曲色素。
本标准适用于果品制品中红曲色素的测定。
2 原理
样品中红曲色素经提取，净化后，TLC分离，与标准TLC板比较定性，选用分配系数在两相中不同而达到分离的目的。
3 试剂
3.1 甲醇；
3.2 正己烷＋醋酸乙酯＋甲醇（5＋3＋2）；
3.3 氯仿＋甲醇（8＋3）；
3.4 石油醚：沸程60～90℃；
3.5 硅胶：柱层析用，120～180目；
3.6 硅胶GF254；
3.7 海砂：先用1﹕10盐酸煮沸15min，用水洗至中性，再于105℃干燥，贮于具塞的玻璃瓶中，备用；
3.8 红曲色素的标准溶液：取1g红曲色素，加入30mL甲醇溶解，然后加入5g硅胶，拌匀，装入50g硅胶层析柱中（湿法装柱），将拌有硅胶的红曲色素装在柱项，后用甲醇洗脱；直至洗脱下来的甲醇无色为止，然后减压浓缩至膏状，于60～70℃烘箱中烘干，约剩下0.89g的红曲色素作为薄层分析用标准品。用甲醇配成1 mg/mL的标准溶液；
3.9 红曲色素标准使用液：临用时吸取标准溶液5.0mL，置于50mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，此溶液每毫升相当于0.1mg红曲色素。
4 仪器
4.1 微量注射器10μL；
4.2 展开槽25cm×6cm×4cm；
4.3 薄层板：市售预制硅胶GF254板；
4.4 层析柱；
4.5 接收瓶；
4.6 全玻璃浓缩器；
4.7 真空泵。
5 分析步骤
5.1 样品处理
取10mL果品制品（果酒）样品，于水浴上挥干，加少量乙醇溶解残渣，进行薄层分析。
5.2 测定
5.2.1 点样：取市售硅胶GF254板（4cm×20cm），离底边2cm处，点上述样品溶液10μL，同时在右边点2μL色素标准溶液。
5.2.2 展开：将5.2.1已点上样品与标准品的二块板，分别放入试剂“甲醇”和“正己烷＋醋酸乙酯＋甲醇（5＋3＋2）”中展开，待展开剂前沿至15cm处，取出，放入通风橱，晾干，在UV254nm下观察，试剂“甲醇”得到4个点，Rf 值分别分0.86，0.71，0.54，0.38，试剂“正己烷＋醋酸乙酯＋甲醇（5＋3＋2）”得到3个点，Rf值分别为0.86，0.69，0.57。样品与标品的斑点的Rf值一致。则证明样品中含有红曲色素。
6 参考文献
中华人民共和国国家标准《食品中红曲色素的测定》（GB/T 5009.150）
