中华人民共和国国家标准
GB/T 5009.149
果品制品-栀子黄的测定-薄层色谱法
1 范围
本方法规定了薄层色谱法测定食品中栀子黄色素。本标准适用于饮料、果酒中栀子黄的测定。
2 原理
试样中栀子黄色素用有机溶剂提取,并经过纯化处理,去除干扰物质,浓缩点样展开后,在UV254nm灯下呈黑色斑点,与标准比较进行定性,及概略定量。
3 试剂
所用试剂均为分析纯,水蒸馏水。
3.1 甲醇;
3.2 乙醇;
3.3 乙酸乙酯;
3.4 丙酮;
3.5 甲酸;
3.6 三氯甲烷;
3.7 硅胶GF254:薄层色谱用;
3.8 展开剂:乙酸乙酯+丙酮+甲醇+水(5+5+1+1);
3.9 展开剂:三氯甲烷+甲醇(6+3)。
4 仪器
4.1 全玻璃浓缩器;
4.2 薄层板涂布器;
4.3 玻璃板,4cm×20 cm,20cm×20 cm;
4.4 层析缸;
4.5 UV254nm荧光灯;
4.6 微量注射器。
5 操作方法
5.1 试样处理
5.1.1 果酒:取试样100mL,减压浓缩至无酒味,然后用乙酸乙酯萃取,每次30mL,萃取3次~5次,至无栀子黄颜色为止,合并萃取液,减压浓缩至无乙酸乙酯味。约剩20mL为止,此液留作薄层分析用。
5.1.2 饮料:取试样100mL,用乙酸乙酯萃取,每次50mL,萃取3次~5次,至无栀子黄颜色为止,合并萃取液,减压浓缩至无乙酸乙酯味。约剩20mL为止,此液留作薄层分析用。
5.2 测定
5.2.1 点样:取市售硅胶GF254荧光板,离板底2cm处点试样提取液0.5μL,板的右边点2μL栀子黄色素标准溶液。
5.2.2 展开:将已点好样液和标准溶液的薄板,用展开剂[乙酸乙酯+丙酮+甲醇+水(5+5+1+1);三氯甲烷+甲醇(6+3)]展开,待栀子黄色素明显分开后取出,晾干,与标准斑点比较,栀子黄Rf值为0.64和0.50。而姜黄色素为0.11和0.15。试样与标品的斑点的Rf 值一致,则证明试样中的色素为栀子黄色素。
6 参考文献
中华人民共和国国家标准《食品中栀子黄的测定》(GB/T 5009.149)