中华人民共和国国家标准
GB/T 5009.93-2003
果品制品－硒的测定－氢化物原子荧光光谱法
1 范围
本方法适用于各类果品制品中硒含量的测定。
本方法的检出限为0.5ng/mL，线性范围为0ng/mL～400ng/mL。
2 原理
试样经酸加热消化后，在6mol/L盐酸（HCl）介质中，将试样中的六价硒还原成四价硒，用硼氢化钠（NaBH4）或硼氢化钾（KBH4）作还原剂，将四价硒在盐酸介质中还原成硒化氢，由载气（氩气）带入原子化器中进行原子化，在硒特制空心阴极灯照射下，基态硒原子被激发至高能态，在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与硒含量成正比。与标准系列比较定量。
3 试剂
3.1 硝酸（优级纯）；
3.2 高氯酸（优级纯）；
3.3 盐酸（优级纯）；
3.4 混合酸：硝酸+高氯酸（4+1）混合酸；
3.5 氢氧化钠（优级纯）；
3.6 硼氢化钠溶液（8g/L）：称取8.0g硼氢化钠（NaBH4），溶于氢氧化钠溶液（5g/L）中，然后定容至1000mL；
3.7 铁氰化钾（100g/L）：称取10.0g铁氰化钾（K3[Fe（CN）6]），溶于100mL水中，混匀；
3.8 硒标准储备液：精确称取100.0mg硒（光谱纯）,溶于少量硝酸中，加2mL高氯酸，置沸水浴中加热3h～4h，冷确后再加8.4mL盐酸，再置沸水浴中煮2min，准确稀释至1000mL，其盐酸浓度为0.1mol/L，此储备液浓度为每毫升相当于100μg硒；
3.9 硒标准应用液：取100μg/mL硒标准储备液1.0mL，定容至100mL，此应用液浓度为1μg/mL。
4 仪器
4.1 原子荧光光度计；
4.2 电热板；
4.3 自动控温消化炉。
5 操作步骤
5.1 试样准备
5.1.1 取可食部位，用水洗净后用纱布吸去水滴，打成匀浆后备用。
5.1.2 称取0.5g～2.0g试样于150mL高筒烧杯内，加10.0mL混合酸及几粒玻璃珠，盖上表面皿，冷消化过夜。次日于电热板上加热，并及时补加混酸。当溶液变为清亮无色并伴有白烟时，再继续加热至剩余体积2mL左右，切不可蒸干。冷却，再加5mL6mol/L盐酸，继续加热至溶液清亮无色并伴有白烟出现，以完全将六价硒还原成四价硒。冷却，转移定容至50ml容量瓶中。同时做空白实验。
5.1.3 吸取10mL试样消化液于15mL离心管中，加浓盐酸2mL，铁氰化钾溶液1mL，混匀待测。
5.2 标准曲线的配制
分别取0.0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mL标准应用液于15mL离心管中，用去离子水定容至10mL，再分别加浓盐酸2mL，铁氰化钾1mL，混匀，制成标准工作曲线。
5.3 测定
5.3.1 仪器参考条件：负高压：340V；灯电流：100mA；原子化温度：800℃；炉高：8mm；载气流速：500mL/min；屏蔽气流速：1000mL/min；测量方式：标准曲线法；读数方式：峰面积；延迟时间：1s；读数时间：15s；加液时间：8s；进样体积：2mL。
5.3.2 测定：根据实验情况任选以下一种方法。
5.3.2.1 浓度测定方式测量：设定好仪器最佳条件，逐步将炉温升至所需温度后，稳定10min～20min后开始测量。连续用标准系列的零管进样，待读数稳定之后，转入标准系列测量，绘制标准曲线。转入试样测量，分别测定试样空白和试样消化液，每测不同的试样前都应清洗进样器。试样测定结果按5.4公式计算。
5.3.2.2 仪器自动计算结果方式测量：设定好仪器最佳条件，在试样参数画面，输入以下参数：试样质量(g或mL)，稀释体积（mL），并选择结果的浓度单位。逐步将炉温升至所需温度后，稳定10min～20min后开始测量。连续用标准系列的零管进样，待读数稳定之后，转入标准系列测量，绘制标准曲线。在转入试样测定之前，再进入空白值测量状态，用试样空白消化液进样，让仪器取其均值作为扣底的空白值。随后即可依次测定试样。测定完毕后，选择“打印报告”即可将测定结果自动打印。
（下略）
