中华人民共和国国家标准
GB T 5009.33 2003
果品制品－硝酸盐的测定－镉柱法
1 范围
本方法适用于各类果品制品中硝酸盐含量的测定。
本方法的检出限为1.4mg/kg。
2 原理
样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，溶液通过镉柱，使其中的硝酸根离子还原成亚硝酸根离子，在弱酸性条件下，亚硝酸根与氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成红色染料，测得亚硝酸盐总量，由总量减去亚硝酸盐含量即得硝酸盐含量。
3 试剂
3.1 盐酸溶液（0.1mol/L）：吸取5mL盐酸，用水稀释至600mL；
3.2 稀氨缓冲液：量取50mL氨缓冲液，加水稀释至500mL，混匀；
3.3 氯化铵缓冲溶液（pH9.6～9.7）：量取20mL盐酸，加50mL水，混匀后加50mL氨水，再加水稀释至1000mL，混匀；
3.4 硝酸钠标准溶液：准确称取0.1232g于110℃～120℃干燥恒重的硝酸钠，加水溶解，移于500mL容量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于200μg硝酸钠；
3.5 硝酸钠标准使用液：临用时吸取硝酸钠标准溶液2.5mL，置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于5μg硝酸钠；
3.6 亚硝酸钠标准使用液：准确称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。制成亚硝酸钠标准溶液。临用时，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00mL，置于200mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5.0μg亚硝酸钠。
4 仪器
4.1 镉柱
4.1.1 海绵状镉粉的制备：投入足够的锌皮或锌棒于500mL硫酸镉溶液（200g/L）中，经3h～4h，当其中的镉全部被锌置换后，用玻璃棒轻轻刮下，取出残余锌棒，使镉沉底，倾去上层清液，以水用倾泻法多次洗涤，然后移入粉碎机中，加500mL水，捣碎约2s，用水将金属细粒洗至标准筛上，取20目～40目之间的部分。
4.1.2 镉柱的装填：用水装满镉柱玻璃管。并装入2cm高的玻璃棉做垫，将玻璃棉压向柱底是地，应将其中所包含的空气全部排出，在轻轻敲击下加入海绵状镉至8cm～10cm高，上面用1cm高的玻璃棉覆盖，上置一贮液漏斗，未端要穿过橡皮塞与镉柱玻璃管紧密连接。
如无上述镉柱玻璃管时，可以25mL酸式滴定管代用。
当镉柱填装好后，先用25mL盐酸（0.1mol/L）洗涤，再以水洗两次，每次25mL，镉柱不用时用水封盖，随时都要保持水平面在镉层之上，不得使镉层夹有气泡。
4.1.3 镉柱每次使用完毕后，应先以25mL盐酸（0.1mol/L）洗涤，再以水洗两次，每次25mL，最后用水覆盖镉柱。
4.1.4 镉柱还原效率的测定：吸取20mL硝酸钠标准使用液，加入5mL稀氨缓冲液，混匀后依照后面的5.2.2～5.2.3进行操作。取10.0mL还原后的溶液（相当10μg亚硝酸钠）于50mL比色管中，另吸取0.00，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00，1.50，2.00，2.50mL亚硝酸钠标准使用液（相当于0，1，2，3，4，5，7.5，10，12.5μg亚硝酸钠），分别置于50mL带塞比色管中。于标准管和试样管中分别加入2mL对氨基苯磺酸溶液（4g/L），混匀，静置3min～5min后各加入1mL盐酸萘乙二胺溶液（2g/L），加水至刻度，混匀，静置15min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线。同时做试剂空白。根据标准曲线计算测得结果，与加入量一致，还原效率应大于98％为符合要求。
(下略)
