中华人民共和国国家标准
GB T 5009.33 2003
果汁－亚硝酸盐的测定－示波极谱法
1 范围
本方法规定了食品中亚硝酸盐的测定方法，其检出限为1 mg/kg。（亚硝酸盐测定）
2 原理
浓缩果汁、果汁及其饮料中的亚硝酸盐主要是植物从土壤中吸收后存积地果实中带来的，多以钠盐的形式存在。样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸性的条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，在弱碱性条件下再与8-羟基喹啉偶合形成橙色染料，该偶氮染料在汞电极上还原产生电流，电流与亚硝酸盐的浓度呈线性关系，可与标准曲线比较定量。
3 试剂
3.1 亚铁氰化钾溶液：称取106.0g亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6•3H2O]，用水溶解，并稀释至1000mL；
3.2 乙酸锌溶液：称取220.0g乙酸锌[Zn(CH3COO)2•2H2O]，加30mL冰乙酸溶于水，并稀释至1000mL；
3.3 饱和硼砂溶液：称取5.0g硼酸钠（Na2B4O7•10H2O），溶于100mL热水中，冷却后备用；
3.4 对氨基苯磺酸溶液（8g/L）：称取2g对氨基苯磺酸，用热水溶液，再加25mL盐酸（1.0mol/L），移至250mL容量瓶稀释至刻度；
3.5 8-羟基喹啉溶液（1g/L）：称取0.250g 8-羟基喹啉，加4mL盐酸（0.1mol/L）和少量水溶解，移至250mL容量瓶稀释至刻度；
3.6 EDTA溶液（0.10 mol/L）：称取3.722gEDTA（C10H14N2O8Na•2H2O）加水30mL溶解，转入100mL容量瓶中用水稀释至刻度；
3.7 氨水（5%）：吸取28%的浓氨水5.00mL于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度；
3.8 亚硝酸钠标准溶液：准确称取0.1000g亚硝酸钠于硅胶干燥器中24h，加水溶解移入500mL容量瓶中，并稀释至刻度，此溶液每毫升相当于200μg亚硝酸钠；
3.9 亚硝酸钠标准使用液：准确称取亚硝酸钠标准溶液5.00mL于200mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5μg亚硝酸钠。再取10.00mL该稀释液于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于0.5μg的亚硝酸钠。
4 仪器
4.1 小型绞肉机；
4.2 示波极谱仪。
5 分析步骤
5.1 样品处理
称取5.000g经绞碎混匀的样品，置于50mL烧杯中，加12.5mL硼砂饱和液，搅拌均匀，以70℃的水300mL将样品洗入500mL容量瓶中，于沸水溶中加热15min取出后冷却至室温，然后一面转动，一面加入5mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。加水至刻度，摇匀，放置30min，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去初滤液50mL，滤液备用。
5.2 测定
吸取3mL上述滤液于10mL容量瓶（或比色管）中，另取0、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00mL亚硝酸钠标准溶液（相当于0、0.25、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50μg亚硝酸钠）于10mL容量瓶（或比色管）中。于标准与样品管中分别加入0.20mL EDTA溶液（0.10 mol/L），1.50mL对氨基苯磺酸溶液（8g/L），混匀，静止3～4min后各加入1.00 mL8-羟基喹啉溶液（1g/L）和0.5mL氨水（5%），用水稀释至刻度，混匀，静止10～15min，将试液全部转入电解池中（10mL小烧杯）。在示波极谱仪上采用三电极体系进行测定（滴汞电极为工作电极，饱和甘汞电极为参比电极，铂电极为铺助电极）。
5.3 测定参考条件
原点电位调节在－0.2V；倍率为0.1（可以根据试样中亚硝酸盐含量多少选择合适的倍率，含量高，倍率高，倍率选择在0.1以上；反之，倍率选择在0.1以下）；电极开头拔至三电极、导数档；测量开关拔至阴极。
将三电极插入电解池中，每隔7s仪器自行扫描一次，在荧光屏上记录－0.56 V左右（允许电位波动10～20 mV）的极谱波高，绘制标准曲线比较。
(下略)
